2022年8月11日

有可能在保持高质量的同时扩大细胞产量吗?

是的,在生物反应器中使用Biolaminin®涂层的微观和宏观珠子大规模培养多能干细胞已被证明在数量和质量上都能满足临床需求


Biolaminin 521涂层微载体系统由于其三维悬浮性质,可以很容易地在动态大规模培养系统中放大,如搅拌生物反应器。由于更好的氧合,更好的代谢物质量运输和有限的微环境毒性,该系统导致高容量细胞产量。与单层培养相比,该系统可以低成本、符合gmp要求的生产大量临床级hPSC,具有一致和可预测的特征,以满足开发细胞治疗的需求。

可定义和可扩展的生物处理平台,使用基于Biolaminin 521的微载体系统生产hPSCs

据报道,具有Biolaminin-521涂层微载体的生物反应器系统提供了一个gmp兼容和可扩展的生物处理平台,用于生产临床应用的数量和质量符合要求的人类胚胎干细胞(hESCs) (Lam et al. 2015)。BioLaminin 521涂层微载体在搅拌条件下有效地支持hESC的附着、扩散和生长,而不需要额外的正电荷。重要的是,培养的细胞保持多能性超过10传代,并保持正常的核型。这些细胞能够分化为所有三个胚层的谱系,然后特异性地分化为心肌细胞。

A)培养7天后包覆聚苯乙烯微载体(MC)上hes3胚胎干细胞的密度。图像显示代表性的hESC/MC聚合体,比例尺为200 μm。修改自Lamet al. 2014干细胞与发育,图4 (CC BY 4.0)。PLL =聚l -赖氨酸,LM = laminin-111。

使用Biolaminin 521涂层微载体,从hPSCs中扩大临床适应性红细胞生产

一种化学定义的方法,利用Biolaminin 521和基于微载体的悬浮培养,用于扩大红细胞(RBC)的产量(Sivalingam等人,2018年,Sivalingam等人,2020年)。与传统的基于胚状体的方法相比,改善的细胞存活率和更好的质量过程导致造血前体扩张和红细胞产量的显著改善。

Biolaminin 521作为一种在闭细胞膨胀系统中大规模膨胀hiPSCs的优质中空纤维涂层衬底

涂有Biolaminin 521的量子细胞扩张系统(QES)被证明为指数诱导多能干细胞(iPSC)生长提供了必要的环境(Mesquita等人,2019年)。在QES中使用vitronectin涂层时,没有观察到iPSC呈指数级增长,即使在两种条件下介质消耗相同。这说明涂层对细胞的增殖率有重要影响。

A) LN521涂层显著促进细胞增殖。

B)细胞保持多能性,核型和所有三个胚层的分化能力。所测多能性标记的子集如图所示。摘自Mesquita等人,2019年国际干细胞,无花果。2和3 (CC BY 4.0)。

使用Biolaminin 521包被微载体从干细胞中产生巨核细胞用于出血性疾病的血小板输注

搅拌生物反应器中Biolaminin 521涂层微载体珠也被证明可将每个iPSC的巨核细胞产量提高10倍(Eicke等人,2018年)。巨核细胞是血小板的前体,它们可用于血小板的产生,以及血小板衍生生长因子的来源。用该系统获得的巨核细胞具有成熟细胞的典型特征,并能产生血小板在体外而且在活的有机体内.大量使用新鲜血小板的可能性将促进巨核细胞为基础的治疗策略的发展。

A)使用Biolaminin 521涂层的无孔聚苯乙烯微载体(cell-MC),每个输入iPSC可以产生30个巨核细胞(MKs),相比之下,细胞聚合悬浮培养(cell-OA)只能产生4个MKs。B)前血小板细胞形成比例高,表明MK细胞有功能。摘自Eicke等人,2018年科学报告,图。3,4 (cc乘4.0)

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