2018年11月8日

生物胺521干细胞基质

人类ES和iPS细胞的单细胞传代无需岩石抑制剂


生物胺521ln (LN521)是全长的重组人层粘连蛋白521细胞培养底物。它为人类PSCs、MSCs和大多数依赖锚定的祖细胞类型在完全化学定义、无动物成分条件下的无喂养培养提供了最佳环境。LN521提供了一个单细胞传代hPSC培养系统,它是介质独立的,并提供了一个周末无协议。重要的是,细胞行为可预测,均质多能性和核典型稳定。

生物胺521ln -人重组层连蛋白521 (LN521-02)

生物学上与干细胞有关

层板蛋白是几乎所有细胞周围基膜中的糖蛋白。层板蛋白与细胞表面受体结合,激活细胞信号级联,产生功能更强、更真实的细胞。

层粘连蛋白521是天然干细胞生态位的关键基膜蛋白,在胚胎内细胞团中由hPSCs表达和分泌。因此,LN521支持hESCs和hiPSCs的可靠扩展和后续的细胞谱系规范。对稳定和均一不同hESC系间的多能性基因表达谱也有积极作用。

功能和规格

  • 定义和动物成分无(初级水平)底物
  • 生物相关的hPSC培养环境
  • 同质和基因稳定的hPSC培养
  • 简单灵活的培养系统
  • 性能一致可靠
  • 迅速扩大
  • 支持周末无喂养制度
  • 更有效的分化和增强细胞成熟,极化和组织
  • 科学证明
  • 仅供研究用途

hPSCs在LN521上稳定、均匀、单分子扩张

•单细胞低密度播种
•不需要凋亡抑制剂(ROCKi)
•适合衍生和基因编辑
•细胞表现出高运动性
•允许克隆生存
•单层生长
•细胞变得越来越紧,越来越小
•无自发分化
•可在汇流处生长
•通过酶或EDTA
•与任何无血清培养基兼容

LN521上的细胞扩张更快

无自发的hPSC分化

当细胞在LN521上培养时,细胞保持多能性(Oct4+;粉色),没有分化区域(只有DAPI;与在其他基质上培养的细胞相比,蓝色)是可见的。

简单可靠的协议

  1. LN521涂层板
  2. 用PBS冲洗融合细胞,加入游离酶或EDTA -孵育
  3. 分离成单细胞悬浮液,离心并在选择的新鲜培养基中重悬颗粒
  4. 将细胞播种在新鲜的LN521镀膜板上

参考文献

  • 罗丹,李文华,李文华,等。在确定的和无异种环境下,层粘连蛋白-521/ e -钙粘蛋白基质上克隆培养人胚胎干细胞。2014;5:3195
  • Rodin S, Antonsson L, Hovatta O, Tryggvason K.在无xeno和化学定义条件下,基于laminin-521基质的人多能干细胞的单层培养和克隆。通信学报,2014;9(10):2354-2368
  • Laperle A, Hsiao C, Lampe M,等。Α-5人多能干细胞合成的层粘连蛋白促进自我更新。干细胞杂志2015;5(2):195-206
  • Jacobs K, Zambelli F, Mertzanidou A,等。高密度培养人胚胎干细胞会导致dna损伤和基因组不稳定。干细胞报告。2016;6(3):330-341
  • 李文华,李文华,李文华,等。层粘连蛋白521稳定了最初来源于饲养细胞的人胚胎干细胞的多能性表达模式。干细胞国际杂志2018;2018:7127042

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