2019年11月7日

Exo-spin™mini-HD柱

一种分离高质量外泌体的可靠方法

外泌体研究在治疗学和诊断学中发挥着越来越重要的作用。因此，需要高效可靠的外泌体分离方法。

在其他方法中，尺寸排除色谱(SEC)被广泛用于从所有生物流体中分离外泌体，因为它显示出高度纯净和浓缩的样品。此外，SEC可以在不同的方案下进行，包括离心和重力流。在重力作用下，一个样品可以收集成分数，并分析一个完整的高分辨率的分数剖面。

在本页，我们重点介绍了Exo-spin™mini-HD套件细胞引导系统作为一种从人血清中分离外泌体的新工具。

Exo-spin™技术

Exo-spin™技术结合了沉淀和SEC，使其优于仅依赖沉淀的技术，后者导致大量非外泌体蛋白和其他物质的共纯化，以及沉淀剂的携带。

离心去除细胞和细胞碎片
沉淀含有外泌体的部分(血液样本(血浆和血清)不需要)
将含有外泌体的颗粒添加到Exospin™mini-HD柱中进行SEC纯化

证交会法

**图1:SEC简介**
SEC是一种根据颗粒大小分离溶液中的颗粒的方法。色谱柱被稳定的聚合珠(树脂)填充，形成多孔基质。当将含有外泌体的溶液添加到SEC柱中时，较小的颗粒将被困在孔隙中，而较大的颗粒不会进入孔隙并首先洗脱。因此，不同的洗脱馏分将包含不同大小的颗粒;首先是大粒子，然后是小粒子。

该技术是实现高纯度样品的理想方法，其中外泌体与其他非外泌体成分分离，并且它与低和高初始样本量兼容。

人血清外泌体分离

方法

10 ml人血清起始量来自英国剑桥生物科学公司(Cambridge Bioscience)。

随后，将100µl该样品添加到Exo-spin™mini-HD色谱柱中，然后加入100µl PBS，然后是23 x 200µl PBS，直到收集200µl的24个馏分。因此，对所得馏分进行了分析，并生成了馏分剖面。

结果

**图2:使用Exo-spin™mini-HD的人血清分馏剖面。**
蛋白质浓度由Bradford法估计(灰色)，颗粒浓度(蓝色)由Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)测量，使用的是particle Metrix的ZetaView®仪器。

分离分析

从分数1到5，没有从Exo-spin™miniHD柱中洗脱外泌体。分数6和7含有外泌体，分数7中外泌体浓度最高，这两个分数中的蛋白质污染都很低。样品中存在的绝大多数蛋白质在随后的馏分中洗脱。

复苏

在分离之前对人血清样本进行外泌体浓度测定，并测量80%的回收率。

结论

Exo-spin™mini-HD允许从1到75 ml(细胞培养基，尿液，唾液，脑脊液和任何其他低蛋白生物液)和1到150µl血液样本(血浆和血清)的高分辨率分馏方案。由于Exo-spin™mini-HD通过重力操作，因此不需要特殊设备。

168博金宝

Exo-spin™，5个mini-HD柱(EX05-5)

Exo-spin™，20个mini-HD柱(EX05-20)

Exo-spin™，100个mini-HD柱(EX05-100)

Exo-spin™buffer, 30ml (EX06-30)

Exo-spin™buffer, 250 ml (EX06-250)