2013年2月8日

ELISpot试验原理

elisa法是一种敏感的定量测定细胞因子分泌细胞数量的方法


酶联免疫斑点法(ELISpot)是一种高度敏感的免疫分析法,可以在单细胞水平上测量细胞因子分泌细胞的频率。在这个实验中,细胞培养在表面涂有特定的捕获抗体在存在或不刺激。细胞分泌的蛋白质,如细胞因子,会被表面的特异性抗体捕获。在适当的孵育时间后,去除细胞,使用与ELISA相似的检测抗体检测分泌的分子。检测抗体要么是生物素化,然后是链霉亲和素-酶缀合物,要么抗体直接缀合到酶上。通过使用具有沉淀而不是可溶产物的基质,最终的结果是在表面上有可见的斑点。每个点对应一个单独的细胞因子分泌细胞。

ELISpot分析原理示意图。

敏感的

ELISpot检测在分泌后立即捕获细胞因子的存在,与受体结合或蛋白酶降解导致的测量结果相反。该测定法被认为是目前最敏感的细胞测定法之一。检测的极限通常可以达到100,000个细胞中的1个。高灵敏度的化验使它特别有用的研究小群体的细胞发现在特定的免疫反应。

20多年来,Mabtech一直致力于ELISpot协议的优化。新的蛋白质被不断添加到可被ELISpot分析的分析物范围中。

容易执行

采用96孔板进行ELISpot分析,并使用自动ELISpot分析仪进行分析。因此,该分析方法易于执行,并允许对大量样品进行快速分析。它也是稳健的,适合大规模试验和实地研究。用捕获抗体预涂层板和一步检测试剂提供了额外的优势。ELISpot方法在特定环境下的标准化得到了很好的描述,该方法是fda批准的诊断测试——结核t点测试的基础。

ELISpot技术不局限于细胞因子的测量;它也适用于几乎任何分泌蛋白,单细胞分析是感兴趣的。这种方法最初是用来量化免疫球蛋白分泌细胞的。

ELISpot包

Mabtech为小型一线研究小组以及大型疫苗试验提供高质量的ELISpot试剂。Mabtech的高质量单克隆抗体平台使您可以根据自己的条件进行研究。他们知道所有的研究人员都有不同的需求——为了适应这一点,他们提供了许多不同格式的ELISpot试剂盒。

ELISpotBASIC

根据您的需要定制ELISpot分析。

Mabtech的ELISpotBASIC提供适合用户谁想建立和优化他们的分析试剂。已开发用于ELISpot的试剂,包括匹配的单克隆抗体和链霉亲和素酶缀合物。对于b细胞ELISpot,包括多克隆激活剂。

ELISpotBASIC产168博金宝品可在4版格式,也可以提供更大的数量要求。

请注意,虽然板和基板不包括在ELISpotBASIC,它们可以单独购买。

包内容

  • 捕捉马伯
  • 生物素化的检测马伯
  • 链霉亲和素酶结合物(ALP或HRP)
  • 多克隆激活剂(仅用于b细胞ELISpot)

ELISpotPLUS包

Mabtech的ELISpotPLUS试剂盒是那些希望获得方便的ELISpot试验所需组件的用户的理想选择,包括预涂有捕获抗体的板。

Mabtech提供ELISpotPLUS包与预涂PVDF板的最佳性能。这些板将捕获抗体结合在孔的膜上,这使得分析更快速,因为它消除了乙醇预处理和抗体涂层步骤从分析协议。此外,预涂层板的使用减少了测定之间的可变性。对于某些分析物,ELISpotPLUS试剂盒也可使用预涂板。当需要的孔数量有限时,例如分析少量样品时,使用预涂板是理想的。

Mabtech的ELISpotPLUS试剂盒有2和10平板格式。

包内容

  • 预涂PVDF板或PVDF带板
  • 生物素化的检测马伯
  • 链霉亲和素酶结合物(ALP或HRP)
  • 基板(BCIP/NBT-plus或TMB)
  • Anti-CD3马伯作为选定系统的阳性控制

ELISpotPRO包

预涂板和一步检测试剂盒。

ELISpotPRO包是Mabtech最具创新精神的产品,在完整的试剂盒中结合了顶168博金宝级性能和快速检测程序,包括预涂层板和ALP或酶标检测抗体。

ELISpotPRO试剂盒是简便、快速、高重现性的最佳选择。由于具有最小的内部和内部变异,它也是大规模疫苗试验的首选。检测抗体与ALP或HRP结合,允许一步检测,使常用的生物素-链霉亲和素步骤多余。ELISpotPRO试剂盒也可与预涂带板增加灵活性。当需要的孔数量有限时,例如分析少量样品时,使用预涂板是理想的。

Mabtech的ELISpotPRO试剂盒有2或10平板格式。

包内容

  • 预涂PVDF板或PVDF带板
  • 单抗一步检测(ALP或HRP偶联)
  • 基板(BCIP/NBT-plus或TMB)
  • Anti-CD3马伯作为选定系统的阳性控制

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